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细胞众里挑一--全自动单细胞分选

来源:www.spzjgc.cn 发布时间:2021年09月24日

为什么要进行单细胞研究?这主要是因为如果将成千上万个细胞混在一起进行研究,就会模糊我们对细胞之间异质性的认识。美国宾夕法尼亚大学James Eberwine就认为,当你的研究深入到单细胞层面时,你就会失去对整个系统的把控,但是如果你能够从整个系统中挑选多个不同的单细胞进行研究,则可以重建出整个系统,而且这种重建过程能够提供更多更有价值的信息。

 

2月28日国内首例采用单细胞高通量测序技术的第三代试管婴儿甜甜(化名)顺利诞生。据介绍,“甜甜”的父亲患有甲状腺癌,将有50%的机会将致病基因遗传给下一代,通过最新的基因筛查以及测序技术,医学专家阻断了婴儿家族性甲状腺癌遗传的可能。


文章中提到的单细胞高通量测序技术,该技术的基础是单细胞分离,对细胞进行分析时所需要的细胞数量要比对组织进行分析时所需要的组织数量多很多。

 

基于单细胞水平实验的首要条件是准确获得 状态良好的单个细胞。目前, 应用的方法主要是有 限稀释法、荧光激活细胞流式分选( FACS)及显微操作3种方法。

 

有限稀释法主要是通过将细胞进行一系列的倍比稀释 最终获得单个细胞,, 这一方法比较传统, 不需特殊设备,  但该方法依赖于梯度稀释计算, 并非直观下的单细胞分离。


FACS是利用流式细胞仪, 借助于细胞表面标记或细胞特性对 特定群体的细胞进行分选, 从而获得单个或群体细胞的方法。该方法费用昂贵, 过程复杂, 分选过程需要对细胞标记,会对细胞活性和状态产生一定的影响。


显微操作则是利用显微操作仪或联合显微镜与微管直观地实现单个细胞分离的方法。

 

Cellsorter 的全自动单细胞分选系统,标记细胞或非标记细胞都可以进行快速高效分选, 而且对于细胞的活性和状态影响不大, 能够快速高效 地控制单个细胞的吸取与释放, 仪器每个循环可以筛选多达1000个细胞,并且可以将细胞准确放置在80个PCR管中。