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【激光全息应用】基于抗体芯片技术检测血癌细胞药物疗效

来源:www.spzjgc.cn 发布时间:2021年09月24日

血癌细胞与其他肿瘤细胞不同,属于悬浮细胞,分布在培养基中的不同层,普通显微镜很难聚焦,因此需要其他的细胞分析方法。激光全息细胞成像分析系统M4提供了一种实时无标记分析细胞功能方法。


依托泊甙(etoposide,别名:足叶乙苷、依托扑沙)是一种光谱的抗肿瘤药物。临床用于白血病、小细胞肺癌、恶性淋巴癌、卵巢癌、绒毛膜癌、睾丸癌、膀胱癌、前列腺癌等。


2010年Stybayeva使用CD4/CD8抗体特异芯片捕获并分析HIV感染的T细胞,发现CD4和CD8 T细胞的比率,是重要的HIV诊断标志物,得到的结果与其他方法得到的数据相符。


Zahra通过抗体芯片捕获弥漫大B细胞性淋巴瘤U2932细胞和Jurkat细胞,使用激光全息非侵入分析这些细胞,原理如图1所示,抗体为 Lewis X Clone-1.。该篇文章主要分析依托泊甙处理白血病T细胞和B细胞后,细胞死亡形态标志物。包括体积,面积,不规则度,偏心率等。


图1.抗体芯片捕获悬浮细胞后的全息图 (A) 参考光 (B) 物光通过物体后 (C) 干涉图像(D) 计算机计算得到的图像 (E) 软件分割(F)3D重构。


实验目的

分析依托泊甙处理白血病T细胞和B细胞后,细胞死亡形态标志物,包括体积,面积,不规则度,偏心率等变化,从形态学方面评价药效。


实验材料

U2932细胞和Jurkat细胞,抗体为 Lewis X Clone-1.

图2 药物依托泊甙处理Jurkat细胞


图2依托泊甙Etoposide和DMSO处理Jurkat细胞后,细胞随时间减小 。使用激光成像系统分析Hstudio 软件,得到细胞参数随时间变化曲线图3所示。Etoposide处理细胞后,细胞数,平均细胞面积,厚度,体积都减小,平均偏心率稍微增加,平均不规定度急剧增加。对照组细胞形态学没有很明显的变化。